細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)是Wezel在1967年首先創(chuàng)建的,非貼壁依賴性細(xì)胞的一種培養(yǎng)方式。細(xì)胞懸浮于培養(yǎng)基中生長或維持,某些貼壁依賴性細(xì)胞經(jīng)過適應(yīng)和選擇也可用此方法培養(yǎng),懸浮培養(yǎng)規(guī)模可以由幾升一直擴(kuò)大到幾千升,容器之間的連接全部為管道化。細(xì)胞在處于運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的培養(yǎng)基中生長,輔助以深層通入CO2和空氣,以保證足夠的氣體交換及PH值的調(diào)節(jié),通過震蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。
懸浮培養(yǎng)的最大優(yōu)勢就是:增加了有效工作細(xì)胞的數(shù)量,全密閉、管道化系統(tǒng)減少了污染細(xì)胞的機(jī)會(huì),自動(dòng)化程度的提高,減少了人為操作的因素,生物反應(yīng)器容積的擴(kuò)大,提升了終端產(chǎn)品的均一性。體現(xiàn)在獸用生物制品方面,表現(xiàn)為增加了制品的安全性,減少了由接種疫苗導(dǎo)致的副反應(yīng),同時(shí)疫苗的免疫效果優(yōu)于傳統(tǒng)工藝產(chǎn)品。
1、獨(dú)特的懸浮培養(yǎng)技術(shù)。
該技術(shù)使細(xì)胞的懸浮密度更高(3-5×106/ml,遠(yuǎn)大于單層細(xì)胞培養(yǎng)的106/ml),病毒在細(xì)胞內(nèi)的拷貝數(shù)更高,達(dá)到國外同類企業(yè)的相應(yīng)技術(shù)指標(biāo)(146s 不低于4ug/ml,高于單層細(xì)胞培養(yǎng)10倍以上)。對病毒培養(yǎng)液稀釋10—20倍仍能達(dá)到國外同等抗原水平,形成自然濃縮抗原,即便于儲(chǔ)存,又大大降低了生產(chǎn)成本。
2、獨(dú)特的CTF純化技術(shù)。
該技術(shù)達(dá)到了高質(zhì)高效的純化效果,抗原損失僅為10-15%,細(xì)胞蛋白去除60%以上。
3、副反應(yīng)發(fā)生率低。
由于抗原得到有效純化,同時(shí)10倍以上的稀釋使用造成過敏反應(yīng)的雜蛋白含量進(jìn)一步減少,且使用法國Seppic公司Montanide ISA206佐劑,使熱反應(yīng)和過敏反應(yīng)大幅降低。
4、獨(dú)特的質(zhì)控技術(shù)。
該技術(shù)采用國際最新的146S測定技術(shù)準(zhǔn)確定量抗原,使得疫苗批次間的差異最小化(M Harmsen etal, Cyprus, 2006, Musa Alkan et al, 14-17 Oct,2008,Erice, ltaly)。目前國內(nèi)采用生物學(xué)定量法,受毒株活力差異和生物體敏感性不同等方面的影響,難以體現(xiàn)有效抗原含量,因此難以達(dá)到疫苗的穩(wěn)定效力。
5、從根本上去除了污染因素。
從原材料投入到產(chǎn)品產(chǎn)出完全管道化、自動(dòng)化,從根本上排除污染因素,這是傳統(tǒng)單層細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)絕對無法達(dá)到的。
6、疫苗的高效力得到保障。
由于疫苗抗原的純化使得抗原位點(diǎn)得以充分暴露,使雜質(zhì)蛋白對免疫的影響降至最低。由于疫苗抗原含量的可控性,可隨時(shí)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整抗原有效含量。根據(jù)最新報(bào)道,抗原含量的提高可使機(jī)體較早產(chǎn)生應(yīng)答,并可有效履蓋更多的流行變異株(K.E. Brehm et al 14-17 Oct,2008,Erice,ltay)。
根據(jù)國際獸疫局(OIE)2009年出版的陸生動(dòng)物診斷及疫苗使用手冊(Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals 2009, Chapter 2.1.5),口蹄疫滅活疫苗仍是國際獸疫局唯一推薦的產(chǎn)品,是任何新技術(shù)疫苗無法取代的。我們希望金宇保生物藥品有限公司這種新技術(shù)生產(chǎn)的口蹄疫滅活疫苗能夠讓國內(nèi)的用戶以最低的代價(jià)來體驗(yàn)國際高品質(zhì)的疫苗。
金宇保靈生物藥品有限公司懸浮培養(yǎng)技術(shù)攻克了①細(xì)胞篩選訓(xùn)化②病毒篩選訓(xùn)化③培養(yǎng)基配方優(yōu)化④反應(yīng)釜設(shè)計(jì)制造⑤自動(dòng)化遠(yuǎn)程控制系統(tǒng)設(shè)計(jì)應(yīng)用⑥146S平衡檢測技術(shù)⑦CTF抗原純化工藝⑧百倍以上抗原濃縮保存⑨不同學(xué)科領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人才集成。從以上九個(gè)方面的突破,實(shí)現(xiàn)了國內(nèi)生物制藥產(chǎn)業(yè)升級。